TINCIÓN DE GRAM - Laboratorio de Microbiología Informe #4

TINCIÓN DE GRAM

OBJETIVO

Identificar bacterias Gram + y Gram – mediante la tinción de Gram

FUNDAMENTO

Gram Positivas – capa de péptidoglucano más grueso. Color azul oscuro o violeta.

Gram Negativas – capa de péptidoglucano más fino, pero pared celular más compleja. Color rosado tenue.

MATERIALES

• Mechero
• Hisopo
• Cristal Violeta
• Safranina
• Alcohol
• Licor de Gram
• Aceite de inmersión
• Portaobjetos

PROCEDIMIENTO

• Frotis: Tomar con el hisopo una colonia, tratando de no coger el agar. Realizar un frotis de un centímetro cúbico en el portaobjetos. Pasar el portaobjetos por el mechero 5 veces, tratando de no calentarlo mucho.
• Tinción:

1. Poner Violeta por 1 minuto. Lavar
2. Poner Licor de Gram por 1 minuto. Lavar
3. Poner Alcohol Cetona por 10 segundos. Lavar
4. Poner Safranina por 15 segundos. Lavar y dejar secar

• Observarlo a 100x con aceite de inmmersión

OBSERVACIONES

Se debe anotar la morfología:

Forma y si es Gram + o Gram -