CURVA DE HEMOGLOBINA, ESPECTROFOTOMETRO - Informe de laboratorio #5 Bioquímica I

Informe de laboratorio #5

Espectrofotómetro

¿Por qué es espectrofotómetro?

Porque a diferencia del fotocolorímetro y fotómetro, el espectrofotómetro no utiliza filtros, tiene rejilla. Además lee en espectro infrarrojo y su sistema es digitalizado.

Componentes básicos

Panel de control

Botones y funcionamiento

%T

Tanto porciento de transmitancia

Este modo se selecciona moviendo el cursor al menú %T utilizando las teclas cursoras izda/dcha. La pantalla principal mostrará la transmitancia, con las unidades %T, que se lee en números enteros. El haz de luz se detiene mientras mayor concentración haya. Por ejemplo: si es agua destilada tendrá una transmitancia del 100%.

D. opt.

Densidad óptica

Este modo se selecciona moviendo el cursor al modo D. opt. utilizando las teclas cursoras izda/dcha. Sirve para medir la concentración de la sustancia. Es diversamente proporcional a la transmitancia. La pantalla principal mostrará la densidad óptica con unidades absorbancia que se leen en decimales. La longitud de onda puede ajustarse utilizando las teclas cursoras arriba/abajo.

Calibración

Calibración automática: El aparato se calibra automáticamente al prenderse, esto se realiza sin cubeta.

Calibración manual: Se realiza poniendo en una cubeta con una disolución blanca (agua destilada o el reactivo). Luego se presiona la tecla CAL.

Curva de Hemoglobina

Procedimiento

1. Se coloca 5 ml de reactivo cianohemoglobina y 40 ul de sangre en un recipiente.

2. Se mezcla y se deja reposar por 5 minutos.

3. En distintas cubetas se colocan 0,5cm³; 1cm³; 1,5cm³; 2cm³; 2,5cm³; 3cm³.

4. Se mide la densidad óptica de cada cubeta en el espectrofotómetro.

5. Se anotan los resultados y se realiza la gráfica

Resultados

0,5cm³ --- 0,097

1cm³ --- 0,054

1,5cm³ --- 0,28

2cm^{3 ---} 0,15

2,5cm³ --- 0,178

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Bibliografía

· http://www.panreac.es/spanish/practicas/practicas31.htm

· www.boeco.com/download/Manual_S20_S.pdf