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CURVA DE HEMOGLOBINA, ESPECTROFOTOMETRO - Informe de laboratorio #5 Bioquímica I

viernes, 21 de octubre de 2011

Informe de laboratorio #5
Espectrofotómetro
¿Por qué es espectrofotómetro?
Porque a diferencia del fotocolorímetro y fotómetro, el espectrofotómetro no utiliza filtros, tiene rejilla. Además lee en espectro infrarrojo y su sistema es digitalizado.

Componentes básicos


Panel de control
Botones y funcionamiento

%T
Tanto porciento de transmitancia
Este modo se selecciona moviendo el cursor al menú %T utilizando las teclas cursoras izda/dcha. La pantalla principal mostrará la transmitancia, con las unidades %T, que se lee en números enteros. El haz de luz se detiene mientras mayor concentración haya. Por ejemplo: si es agua destilada tendrá una transmitancia del 100%.

D. opt.
Densidad óptica
Este modo se selecciona moviendo el cursor al modo D. opt. utilizando las teclas cursoras izda/dcha. Sirve para medir la concentración de la sustancia. Es diversamente proporcional a la transmitancia. La pantalla principal mostrará la densidad óptica con unidades absorbancia que se leen en decimales. La longitud de onda puede ajustarse utilizando las teclas cursoras arriba/abajo.

Calibración
Calibración automática: El aparato se calibra automáticamente al prenderse, esto se realiza sin cubeta.
Calibración manual: Se realiza poniendo en una cubeta con una disolución blanca (agua destilada o el reactivo). Luego se presiona la tecla CAL.

Curva de Hemoglobina

Procedimiento
1. Se coloca 5 ml de reactivo cianohemoglobina y 40 ul de sangre en un recipiente.
2. Se mezcla y se deja reposar por 5 minutos.
3. En distintas cubetas se colocan 0,5cm3; 1cm3; 1,5cm3; 2cm3; 2,5cm3; 3cm3.
4. Se mide la densidad óptica de cada cubeta en el espectrofotómetro.
5. Se anotan los resultados y se realiza la gráfica

Resultados
0,5cm3 --- 0,097
1cm3 --- 0,054
1,5cm3 --- 0,28
2cm3 --- 0,15
2,5cm3 --- 0,178



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Bibliografía
· http://www.panreac.es/spanish/practicas/practicas31.htm
· www.boeco.com/download/Manual_S20_S.pdf

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