DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES, ALBÚMINA Y GLOBULINA - Informe de laboratorio #5 Bioquímica II

Informe de laboratorio #5

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES, ALBÚMINA Y GLOBULINA

PROTEÍNAS

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.

La proteína más abundante en plasma es la albúmina. Una de sus funciones más importantes es la de permitir el transporte de ácidos grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso.

La concentración de albúmina en plasma influye notablemente en el mantenimiento de la presión coloidosmótica, lo que estaría relacionado con su relativamente bajo peso molecular y su gran carga neta.

En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de diversos orígenes, se observan hiperproteinemias.

En general, ambas situaciones se ven acompañadas también por hipoalbuminemias. Los aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se relacionan casi siempre con deshidratación que produce el consecuente aumento en el contenido proteico del plasma.

Fuente: Mundo Bioanálisis 2010
http://www.mundobioanalisis.com/fabricante/wiener/electrolitos/descarga/1690004.pdf


Materiales
• Muestra de sangre
• Tubo tapa lila
• Reactivos: Biuret y Albúmina
• Cubetas
• Micropipetas
• Centrífuga
• Espectrofotómetro
• Reloj


Procedimiento
1. Extraer una muestra de sangre del paciente con el tubo lila. Centrifugarlo por 10 minutos.
2. En tres tubos de ensayo, marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar:

Proteínas Totales / Biuret

	B	S	D
Estándar		50 ul
Suero/Plasma			50 ul
Reactivo EDTA/Cu	3,5 ml	3,5 ml	3,5 ml

3. El reactivo de viuret tiene que ser llevado a la incubadora a 37ºC por 10 minutos.

4. Colocar en otros tres tubos más:

Albúmina

	B	S	D
Estándar		10 ul
Suero/Plasma			10 ul
Reactivo	3,5 ml	3,5 ml	3,5 ml

5. Medir la absorbancia de los tres tubos en 540nm el de Biuret y 625nm el de Albúmina. 

6. Anota y calcular los resultados y el Índice de Hoffman.

Resultados

Absorbancia albúmina: 

BLANCO	ESTÁNDAR	MUESTRA
0,000nm	0,0572nm	0,635nm

Factor albúmina:

F= 2,7 g/dl / 0,572nm = 4,7202797 

4,7202797 g/dl * 0,635nm = 2,9973776

Resultado de Albúmina 2,99 g/dl

Absorbancia Biuret: 

BLANCO	ESTÁNDAR	MUESTRA
0,000nm	0,0210nm	0,255nm

Factor Biuret:

F= 4,9 g/dl / 0,210nm = 23.33 

23.33 * 0,255nm = 5,95

Resultado de Proteínas Totales 5,95 g/dl

Globulina:

Proteínas totales - Albúmina  = Globulina

5,95 - 2,9973776 = 2.9526224

Resultado de Globulina 2.95 g/dl

Índice de Hoffman:

Albúmina/Globulina 

2,9973776 / 2,9526224 = 1.0135

Índice de Hoffman 1.01

LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA II

1. DETERMINACIÓN DE GLICEMIA ENZIMÁTICA Y GLUCOSURIA
2. DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS REDUCTORES Y CUERPOS CETÓNICOS EN LA ORINA
3. DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
4. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL Y LDL
5. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES, ALBÚMINA Y GLOBULINA
6. DETERMINACIÓN DE GPT Y GOT
7. DETERMINACIÓN DE UREA
8. DETERMINACIÓN DE CREATININA
9. DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA Y HEMATÓCRITO
10. DETERMINACIÓN DE FOSFATASA ALCALINA