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DETERMINACIÓN DE CREATININA - Informe de Laboratorio #8 Bioquímica II

lunes, 20 de agosto de 2012


Informe de Laboratorio #8
DETERMINACIÓN DE CREATININA

MARCO TEÓRICO
Creatinina 
La creatinina es una molécula de deshecho que se genera a partir del metabolismo muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de energía muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día. La creatinina se transporta desde los músculos por medio de la sangre hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de la creatinina y la eliminan en la orina.

Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya que se ha observado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la función renal. Si los riñones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten síntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan comúnmente. 

MATERIALES
Pipeta automática, de ul
Pipeta de 1ml
Muestra (sangre)
Espectrofotómetro
Tubos de ensayo
Cubetas de 1cc
Tubo tapa lila

REACTIVOS
Reactivo Tapa Blanca: solución de ácido pícrico 
Reactivo Tapa Azul: solución de hidróxido 
Standard: solución de creatinina 2 mg/dl.

PROCEDIMIENTO
1. Preparar el reactivo de trabajo, con la mezcla de los reactivos de los frascos de tapa blanca y azul
2. Centrifugar la muestra de sangre a 3000 rpm por 5 minutos.
4. En tres cubetas de 1cc marcadas B (Blanco), S (Estándar) y D (Desconocido), colocar:


B
S
D
R. Trabajo
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
Estándar
-
100 ul
-
Muestra
-
-
100 ul


5. Leer la densidad óptica en espectrofotómetro a 492 nm. 
6. Leer la absorbancia después de 30 s de haber puesto la cubeta, esperar a los 90 s y tomar anotar una nueva medida.
7. Calcular el resultado.


NORMALIDAD
Valores normales de Creatinina: 
0,7 – 1,4 mg/dl Varones
0,6 – 1,1 mg/dl Mujeres

Los adultos con mucha masa muscular pueden tener más creatinina en la sangre que la población normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos creatinina en la sangre de lo normal.

RESULTADOS
Absorbancia
Blanco 0,000 nm
Estándar Muestra
30 s 0,608nm 0,527nm
90 s 0,623nm 0,532nm

0,608 – 0,623 = 0, 015
0,527 – 0,532 = 0,005
0,005 / 0,015 = 0,333 * 2 = 0,666 Normal

Resultado de Creatinina 0,66 mg% 

CONCLUSIÓN
Realizamos una determinación de creatinina cinética, tomando la cantidad de reacción a los 30s y a los 90s. Se puede notar, mientras se esperar los segundos, el incremento de la medida de absorbancia en el espectrofotómetro. Por cual trabajamos junto al espectrofotómetro para tener una medida más exacta y, al colocar el reactivo en la cubeta inmediatamente iniciar la medición de la absorbancia. El color del reactivo fue azul, una vez actuado sobre la muestra y estándar resultó amarillo. 

Para obtener el resultado se restó la absorbancia de los 90s menos la de los 30s, una vez obtenido el resultado se dividió la muestra para el estándar y este resultado se multiplicó para la cantidad conocida del reactivo estándar: 2 mg/dl. Así obteniendo el resultado de 0,66 mg/dl, el cual entra en el rango de la normalidad.

BIBLIOGRAFÍA
Instituto de Cirugía Urológica Avanzada (2002). Creatinina. Recuperado de:

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